StemFit Basic03

Détails

Milieu pour cellules souches et recherche clinique 

StemFit^® est un milieu de culture cellulaire destiné à la recherche clinique en médecine régénérative. Ce milieu pour cellules souches est produit dans des conditions strictement contrôlées et est conforme aux BPF selon les recommandations japonaises. StemFit^® Basic03 ne contient aucun composant humain ou animal. Tous les ingrédients sont recombinants.

Recommandé par le prix Nobel Shin’ya Yamanaka

“StemFit^®, un milieu nouvellement développé sans xeno-contaminants, meilleur milieu pour la culture des cellules hESC et hiPSC avec rLN511E8.” Télécharger le papier ici

Milieu de culture sans cellules nourricières et sans Xeno-contaminants

Le milieu StemFit^® a été développé pour produire des conditions de croissance bien définies et fiables pour les cellules souches. Il contient tous les composants nécessaires à la culture de cellules souches embryonnaires et pluripotentes induites (iPS) sans xeno-contaminants. Ces avantages importants permettent de réduire la variabilité ainsi que la contamination du milieu de culture des cellules souches.

Taux de croissance très reproductible

La culture de cellules souches à l’aide de StemFit^® permet d’obtenir un taux de croissance très reproductible (Fig. 1). Cela permet une planification parfaite des expériences. En effet, fini les variations dues aux différentes conditions de départ causées par les cellules nourricières. L’analyse de la morphologie des cellules souches cultivées dans StemFit^® montre que la forme et la taille de la colonie sont très similaires à celles des cellules cultivées avec des cellules nourricières (Fig. 2).

Fig. 1 : Taux de croissance reproductibles et continus d’une lignée cellulaire humaine iPS. Les cellules hiPS 201B7 ont été ensemencées à différentes concentrations. Le nombre de cellules a été déterminé tous les 7 jours pendant quatre semaines.

Fig. 2 : La morphologie de la colonie a une forme et une taille similaires aux cellules hiPS cultivées avec des cellules nourricières.

Moins de milieu de culture nécessaire

En raison des composants de haute qualité et de la concentration idéale en nutriments, le volume requis de StemFit^® est inférieur à celui d’un milieu conventionnel. De plus, la réduction du nombre d’étape d’alimentation au cours de la semaine crée une différence de volume totale de plus de 50% entre StemFit^® et le milieu conventionnel (Fig 3.).

Fig. 3 : Le volume de StemFit^® peut être réduit de 25% par puit. La réduction de volume peut atteindre au total plus de 50%. 

Une semaine complète sans alimentation

Le maintien des cellules souches est très compliqué et demande beaucoup de travail. Par exemple, les étapes “d’alimentation” des cellules souches pendant la semaine sont très fastidieuses. StemFit^® permet de réduire ces étapes en utilisant le flux de travail hebdomadaire recommandé présenté ci-dessous (Fig. 4).

Fig. 4 : Une semaine sans alimentation avec StemFit^®

Démarrez avec une seule cellule

StemFit^® permet une efficacité de formation de colonie supérieure à partir d’une seule cellule, ce qui minimise les effets du stress et donne des cellules fiables pour les applications en aval. De plus, avec StemFit^® vous pouvez facilement déterminer l’efficacité de la production cellulaire et dupliquer des clones individuels.

Transition facile à partir des cellules nourricières

La majorité des cellules souches sont encore maintenues dans des cultures dépendantes des cellules nourricières. La transition d’un système de cellules nourricières à un système sans cellules nourricières est très simple : changez de milieu deux fois avant de repiquer les cellules et continuez à les cultiver dans StemFit^®. Après 2-3 passages, les cellules nourricières seront complètement diluées et une culture de cellules souches pure sera obtenue (Fig. 5).

Fig. 5 : Transition facile d’un système avec cellules nourricières à un système sans cellules nourricières avec StemFit^®.

Compatible avec de multiples matrices

StemFit^® a été testé sur de nombreuses matrices différentes. Comme le montre la Fig. 6., le taux d’expansion des cellules cultivées dans StemFit^® est beaucoup plus élevé que celui du milieu A provenant du principal concurrent du marché.

Fig. 6 : Différentes matrices de culture ont été utilisées et combinées avec StemFit^® ou avec le milieu A. Le taux d’expansion des cellules 201B7 hiPS a été déterminé après 7 jours.

Profil d’expression génique consistant

La culture des cellules souches est très stressante pour les cellules. Chaque passage et chaque période de croissance pourrait donc introduire des changements indésirables dans le profil génomique. Le CGI Catapult Institute à Londres a justement étudié le profil génomique après utilisation de StemFit^® et ceci après 1 , 3 et 5 passages et l’a comparé à 4 milieux disponibles dans le commerce. L’expression génique la plus consistante a été obtenue en utilisant StemFit^® (Fig. 7 , StemFit^® ou AK03N dans la figure).

Fig. 7 : Expression génique consistante en utilisant le milieu StemFit^® (nom code AK03N). Le profil d’expression utilisant le test TaqMan ScoreCard™ (n=3) a montré que l’expression génique la plus consistante après 5 passages a été obtenue avec le milieu StemFit^®.

Moins de production de lactate

La production de lactate est le résultat d’un stress hypoxique. Les conséquences peuvent être des modifications du profil d’expression du génome ou une différenciation indésirable des cellules souches. Le CGI Catapult Institute à Londres a montré que la production de lactate était considérablement réduite lorsque les cellules étaient cultivées avec StemFit^® (Fig. 8).

Fig. 8 : Le milieu StemFit^® (nom code AK03N) entraine une accumulation de lactate considérablement réduite par rapport à 4 autres milieux pour la culture de cellules souches disponibles dans le commerce.