StemFit Basic03

Milieu de culture cellulaire pour cellules souches - Grade clinique

  • Aucun composant d’origine animale ou humaine
  • Fabriqué dans des conditions strictement contrôlées (conforme aux BPF selon les recommandations japonaises)
  • Milieu pour cellules souches et cellules IPS
  • Économisez plus de 50% de milieu lors de la culture de cellules
  • Taux de croissance reproductibles et constants
  • Taux de prolifération plus élevés
  • Disponible en Europe et aux USA
Prix sur demande


×
Numéro de catalogue Basic03

Détails

Milieu pour cellules souches et recherche clinique 

StemFit® est un milieu de culture cellulaire destiné à la recherche clinique en médecine régénérative. Ce milieu pour cellules souches est produit dans des conditions strictement contrôlées et est conforme aux BPF selon les recommandations japonaises. StemFit® Basic03 ne contient aucun composant humain ou animal. Tous les ingrédients sont recombinants.

 

Recommandé par le prix Nobel Shin’ya Yamanaka

StemFit®, un milieu nouvellement développé sans xeno-contaminants, meilleur milieu pour la culture des cellules hESC et hiPSC avec rLN511E8.Télécharger le papier ici

 

Milieu de culture sans cellules nourricières et sans Xeno-contaminants

Le milieu StemFit® a été développé pour produire des conditions de croissance bien définies et fiables pour les cellules souches. Il contient tous les composants nécessaires à la culture de cellules souches embryonnaires et pluripotentes induites (iPS) sans xeno-contaminants. Ces avantages importants permettent de réduire la variabilité ainsi que la contamination du milieu de culture des cellules souches.

 

Taux de croissance très reproductible

La culture de cellules souches à l’aide de StemFit® permet d’obtenir un taux de croissance très reproductible (Fig. 1). Cela permet une planification parfaite des expériences. En effet, fini les variations dues aux différentes conditions de départ causées par les cellules nourricières. L’analyse de la morphologie des cellules souches cultivées dans StemFit® montre que la forme et la taille de la colonie sont très similaires à celles des cellules cultivées avec des cellules nourricières (Fig. 2).

Fig. 1 : Taux de croissance reproductibles et continus d’une lignée cellulaire humaine iPS. Les cellules hiPS 201B7 ont été ensemencées à différentes concentrations. Le nombre de cellules a été déterminé tous les 7 jours pendant quatre semaines.

Fig. 2 : La morphologie de la colonie a une forme et une taille similaires aux cellules hiPS cultivées avec des cellules nourricières.

 

Moins de milieu de culture nécessaire

En raison des composants de haute qualité et de la concentration idéale en nutriments, le volume requis de StemFit® est inférieur à celui d’un milieu conventionnel. De plus, la réduction du nombre d’étape d’alimentation au cours de la semaine crée une différence de volume totale de plus de 50% entre StemFit® et le milieu conventionnel (Fig 3.).

Fig. 3 : Le volume de StemFit® peut être réduit de 25% par puit. La réduction de volume peut atteindre au total plus de 50%. 

 

Une semaine complète sans alimentation

Le maintien des cellules souches est très compliqué et demande beaucoup de travail. Par exemple, les étapes “d’alimentation” des cellules souches pendant la semaine sont très fastidieuses. StemFit® permet de réduire ces étapes en utilisant le flux de travail hebdomadaire recommandé présenté ci-dessous (Fig. 4).

 

Fig. 4 : Une semaine sans alimentation avec StemFit®

 

Démarrez avec une seule cellule

StemFit® permet une efficacité de formation de colonie supérieure à partir d’une seule cellule, ce qui minimise les effets du stress et donne des cellules fiables pour les applications en aval. De plus, avec StemFit® vous pouvez facilement déterminer l’efficacité de la production cellulaire et dupliquer des clones individuels.

 

Transition facile à partir des cellules nourricières

La majorité des cellules souches sont encore maintenues dans des cultures dépendantes des cellules nourricières. La transition d’un système de cellules nourricières à un système sans cellules nourricières est très simple : changez de milieu deux fois avant de repiquer les cellules et continuez à les cultiver dans StemFit®. Après 2-3 passages, les cellules nourricières seront complètement diluées et une culture de cellules souches pure sera obtenue (Fig. 5).

 

Fig. 5 : Transition facile d’un système avec cellules nourricières à un système sans cellules nourricières avec StemFit®.

 

Compatible avec de multiples matrices

StemFit® a été testé sur de nombreuses matrices différentes. Comme le montre la Fig. 6., le taux d’expansion des cellules cultivées dans StemFit® est beaucoup plus élevé que celui du milieu A provenant du principal concurrent du marché.

Fig. 6 : Différentes matrices de culture ont été utilisées et combinées avec StemFit® ou avec le milieu A. Le taux d’expansion des cellules 201B7 hiPS a été déterminé après 7 jours.

 

Profil d’expression génique consistant

La culture des cellules souches est très stressante pour les cellules. Chaque passage et chaque période de croissance pourrait donc introduire des changements indésirables dans le profil génomique. Le CGI Catapult Institute à Londres a justement étudié le profil génomique après utilisation de StemFit® et ceci après 1 , 3 et 5 passages et l’a comparé à 4 milieux disponibles dans le commerce. L’expression génique la plus consistante a été obtenue en utilisant StemFit® (Fig. 7 , StemFit® ou AK03N dans la figure).

Fig. 7 : Expression génique consistante en utilisant le milieu StemFit® (nom code AK03N). Le profil d’expression utilisant le test TaqMan ScoreCard™ (n=3) a montré que l’expression génique la plus consistante après 5 passages a été obtenue avec le milieu StemFit®.

 

Moins de production de lactate

La production de lactate est le résultat d’un stress hypoxique. Les conséquences peuvent être des modifications du profil d’expression du génome ou une différenciation indésirable des cellules souches. Le CGI Catapult Institute à Londres a montré que la production de lactate était considérablement réduite lorsque les cellules étaient cultivées avec StemFit® (Fig. 8).

Fig. 8 : Le milieu StemFit® (nom code AK03N) entraine une accumulation de lactate considérablement réduite par rapport à 4 autres milieux pour la culture de cellules souches disponibles dans le commerce.

 

 

 

Références

StemFit® est recommandé par les plus grands scientifiques

StemFit® a été développé au Japon en 2014 par la division Aminoscience Ajinomoto. Depuis lors, StemFit® a été cité dans plus de 75 publications scientifiques ! Les réactions de la société scientifique lors de l’utilisation du milieu de culture StemFit® pour les cellules souches embryonnaires et les cellules iPS ont été très positives. Ci-joint une citation de Nakagawa et al., 2014 (laboratoire de Yamanaka) :

„Un nouveau système de culture efficace et sans cellules nourricières pour la culture de cellules souches pluripotentes induites„

StemFit®, un milieu nouvellement développé sans xeno-contaminants, meilleur milieu pour la culture de hESC et hiPSC avec rLN511E8.”

StemFit® est recommendé par CiRA

Le Centre de recherche et d’application sur les cellules iPS a un objectif central : mieux comprendre les cellules iPS et la médecine régénérative, et proposer des protocoles pour les cellules iPS dérivées de souris et d’humains. Pour leur protocole de cellules iPS humaines, ils recommandent d’utiliser StemFit®. Ils ont même écrit un article montrant les caractéristiques supérieures de StemFit® (Nakagawa et al., 2014). Voici une procédure simplifiée disponible sur leur site web :

 

Citations :
Nakagawa, M. et al. (Yamanakas lab) (2014). A novel efficient feeder-free culture system for the derivation of human induced pluripotent stem cells. Scientific Reports, 4:3594.
Morizane R and Bonventre JV (2017). Generation of nephron progenitor cells and kidney organoids from human pluripotent stem cells. Nature Protocols, 12: 195-207.
Camp JG el al. (2017). Multilineage communication regulates human liver bud development from pluripotency. Nature, 456: 533-538.
Takamichi Miyazaki et al. (2017). Efficient Adhesion Culture of Human Pluripotent Stem Cells Using Laminin Fragments in an Uncoated Manner. Scientific Reports, 7: 41165.

et beaucoup d’autres…

 

Tableau de comparaison

REMARQUE IMPORTANTE : Consolidation de la gamme de produits StemFit®

Le constructeur arrête la version internationale des supports Basic02 et Basic04. Nous recommandons le remplacement par Basic04 Complete.

Choisissez votre support : Basic04(CT) pour la recherche fondamentale et Basic03 ou Basic04(CT) pour la recherche clinique.

StemFit® Basic03
StemFit® Basic04 Complete Type
Single-cell cloning Yes Yes
Free of animal & human material Yes Yes
Basic research Yes
Clinical Research Yes Yes
GMP manufacturing Available In preparation
bFGF Sold separately Included (80 ng/mL)
Number od bottles 2 1

 

Applications

Cellules souches cultivées avec succès avec StemFit® :

(basé sur plus de 75 rapports scientifiques)

Cellules souches embryonnaires humaines (hESCs) Cellules souches pluripotentes induites humaines (hiPSCs)
253G1 1020C7
KhES1 1027B3
SEES-3 1027B6
SEES-4 1039A1
SEES-5 1120C12
SEES-6 1123C1-G
SEES-7 1156D15
1156D2
Plus à venir… 1210B2
1231A3
1335A1
1383D2
1383D6
1383D7
201B7
253G1
253G4
32R1
404C2
409B2
414C2
585A1
585B1
836B1
836B3
987A3
987A7
Ff-I06
Ff-I14
Ff-I01
MIFF3
TIG107
TkDA3-4
Plus à venir…

Documents

Manuel

StemFit Basic03_Manuel

Conseils techniques – Clonage cellulaire

StemFit Basic03_Clonage cellulaire

Conseils techniques – Forte expansion

StemFit Basic03_Forte expansion

 

FAQ

Puis-je utiliser Stemfit dans un bioréacteur ?

Il est possible d’utiliser Basic02 dans des bioréacteurs. Une présentation est disponible.

Quelle est la performance de StemFit avec des petits amas de cellules ? Est-il possible que les parois des cellules semblent plus sombres et que le nombre de cellules soit réduit ?

Nous recommandons le passage de cellules uniques, mais le passage de petits amas fonctionne également. La morphologie des cellules variera toujours d’un milieu à l’autre. Parfois, le bord des colonies semble “plus sombre” si vous utilisez StemFit mais en tout cas la morphologie des cellules est toujours bonne. En ce qui concerne le nombre de cellules il y a plusieurs possibilités :

1 : StemFit a tendance à créer des colonies plus compactes par rapport à d’autres milieux donc le nombre de cellules est sans doute plus grand que la confluence apparente.

2 : en général, l’adaptation à un autre milieu nécessite plusieurs passages. La croissance cellulaire devrait être améliorée après 2-3 passages.

Quelle quantité de StemFit dois-je utiliser pour une plaque à 12 puits et quelle densité cellulaire convient ?

En général, le volume moyen dépend de la surface des récipients de culture. Nous vous recommandons un volume moyen de 750 µL avec une densité cellulaire de 5 000 à 10 000 cellules / puit (selon la lignée cellulaire).

Cependant, l’évaportaion est parfois différente entre les différentes tailles de plaques. Si les cellules ne se développent pas correctement, nous recommandons d’augmenter le volume du milieu jusqu’à 1 ml.

3 : l’ajout d’un inhibiteur de rock le jour du passage augmentera la viabilité et le nombre de cellules.

Puis-je utiliser StemFit pour les cellules murines ?

Ce n’est pas possible car les cellules murines ont besoin de différents facteurs de croissance comparé aux cellules ES/iPSCs.

Note et avis

Il n’y a pas encore d’avis.

Seuls les clients connectés peuvent laisser un avis.