Détails
1. Sans composants d’origine animale
Minimisez les risques de contamination virale et de variation d’un lot à l’autre avec une formule sans composants d’origine animale.
2. Une semaine sans alimentation
Le maintien des cellules souches est très compliqué et demande beaucoup de travail. Par exemple, les étapes “d’alimentation” des cellules souches pendant la semaine sont très fastidieuses. StemFit® permet de réduire ces étapes en utilisant le flux de travail hebdomadaire recommandé présenté ci-dessous.
3. Expansion à partir d’une seule cellule et compatibilité avec de multiples matrices
Expansion supérieure après passage de cellules uniques et résultats consistants avec diverses matrices.
Les cellules hiPSC (1210B2) ont été cultivées avec StemFit Basic04 sur différents substrats d’adhésion cellulaire. Le graphique montre le taux d’expansion.
4. Moins de milieu de culture nécessaire
En raison des composants de haute qualité et de la concentration idéale en nutriments, le volume requis de StemFit® est inférieur à celui d’un milieu conventionnel. De plus, la réduction du nombre d’étapes d’alimentation au cours de la semaine crée une différence de volume totale de plus de 50% entre StemFit® et le milieu conventionnel.
Récipient de culture : plaque 6 puits | Temps de culture : 1 semaine
5. Recommendé par le prix Nobel Shin’ya Yamanaka
StemFit® est recommandé par des scientifiques de renom. Le laboratoire de Shin’ya Yamanaka a testé StemFit® et a obtenu d’excellents résultats sur la différenciation de divers types de cellules par le biais du clonage cellulaire.
.
“StemFit®, un milieu nouvellement développé sans xeno-contaminants, meilleur milieu pour la culture des cellules hESC et hiPSC avec rLN511E8.” Télécharger le papier ici
6. Prêt à l’emploi
Procédure simplifiée avec un emballage prêt à l’emploi.
7. Profil d’expression génique consistant
La culture des cellules souches est très stressante pour les cellules. Chaque passage et chaque période de croissance pourrait donc introduire des changements indésirables dans le profil génomique. Le CGI Catapult Institute à Londres a justement étudié le profil génomique après utilisation de StemFit® et ceci après 1 , 3 et 5 passages et l’a comparé à 4 milieux disponibles dans le commerce. L’expression génique la plus consistante a été obtenue en utilisant StemFit® (AK03N dans la figure).
8. Sans FGF
StemFit® ne contient pas de facteur de croissance des fibroblastes (FGF). Ainsi, vous pouvez choisir votre concentration préférentielle de FGF pour vos cellules. Utilisez juste le même milieu de culture pour la différenciation, la reprogrammation et la maintenance. C’est aussi simple que cela.
9. Moins de production de lactate
La production de lactate est le résultat d’un stress hypoxique. Les conséquences peuvent être des modifications du profil d’expression du génome ou une différenciation indésirable des cellules souches. Le CGI Catapult Institute à Londres a montré que la production de lactate était considérablement réduite lorsque les cellules étaient cultivées avec StemFit®.
Le milieu StemFit® (nom code AK03N) entraine une accumulation de lactate considérablement réduite par rapport à 4 autres milieux pour la culture de cellules souches disponibles dans le commerce.
Références
StemFit® est recommandé par les plus grands scientifiques
StemFit® a été développé au Japon en 2014 par la division Aminoscience Ajinomoto. Depuis lors, StemFit® a été cité dans plus de 75 publications scientifiques ! Les réactions de la société scientifique lors de l’utilisation du milieu de culture StemFit® pour les cellules souches embryonnaires et les cellules iPS ont été très positives. Ci-joint une citation de Nakagawa et al., 2014 (laboratoire de Yamanaka) :
„Un nouveau système de culture efficace et sans cellules nourricières pour la culture de cellules souches pluripotentes induites„
“StemFit®, un milieu nouvellement développé sans xeno-contaminants, meilleur milieu pour la culture de hESC et hiPSC avec rLN511E8.”
Citations:
Camp JG el al. (2017). Multilineage communication regulates human liver bud development from pluripotency. Nature, 456: 533-538.
Takamichi Miyazaki et al. (2017). Efficient Adhesion Culture of Human Pluripotent Stem Cells Using Laminin Fragments in an Uncoated Manner. Scientific Reports, 7: 41165.
Comparison table
Choose your media: Basic04(CT) for basic research and Basic03 or Basic04(CT) for clinical research
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StemFit® Basic03
|
StemFit® Basic04 Complete Type
|
| Single-cell cloning |
Yes |
Yes |
| Free of animal & human material |
Yes |
Yes |
| Basic research |
− |
Yes |
| Clinical Research |
Yes |
Yes |
| GMP manufacturing |
Available |
In preparation |
| bFGF |
Sold separately |
Included (80 ng/mL) |
| Number od bottles |
2 |
1 |
Application
Cellules souches cultivées avec succès avec StemFit® :
(basé sur plus de 75 rapports scientifiques)
| Human embryonic stem cells (hESCs) |
Human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) |
| 253G1 |
1020C7 |
| KhES1 |
1027B3 |
| SEES-3 |
1027B6 |
| SEES-4 |
1039A1 |
| SEES-5 |
1120C12 |
| SEES-6 |
1123C1-G |
| SEES-7 |
1156D15 |
|
1156D2 |
| Plus à venir… |
1210B2 |
|
1231A3 |
|
1335A1 |
|
1383D2 |
|
1383D6 |
|
1383D7 |
|
201B7 |
|
253G1 |
|
253G4 |
|
32R1 |
|
404C2 |
|
409B2 |
|
414C2 |
|
585A1 |
|
585B1 |
|
836B1 |
|
836B3 |
|
987A3 |
|
987A7 |
|
Ff-I06 |
|
Ff-I14 |
|
Ff-I01 |
|
MIFF3 |
|
TIG107 |
|
TkDA3-4 |
|
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lus à venir… |
FAQ
Which Extracellular Matrix (ECM) is recommended?
Any commercially available ECMs for hPSCs will work (e.g., iMatrix-511, Geltrex, VTN-N, LN521, Matrigel and Synthemax).
How should I switch medium to Basic04?
We recommend to switch to Basic04CT 2 days before passaging.
Please refer to Technical tips for more detail.
What’s the difference between Basic04 and Basic04CT?
Basic04 does not contain bFGF, therefore bFGF can be added and optimized for a specific purpose. Basic04CT does contain bFGF and can be used for PSC expansion without additional supplement.
Can I use Stemfit in a bioreactor?
It is possible to use Basic02 in Bioreactors. There is a presentation deposit available.
How is the performance of StemFit in small clump splitting? Is it possile that the cell walls seem darker and the cell number is reduced?
We recommend single -cell passaging, but small clump passaging is also working. Cell morphologies will always vary among different media. Sometimes the edge of colonies seems “darker” if you use StemFit, but the morphology is always good. Regarding the cell number there are different possibilities:
1.: StemFit tends to make more packed colonies compared to other media, so the actual number would be larger than it’s surface confluency.
2.: In general, adaption to other medium requires several passages. Cell growth would be improved after 2-3 passages.
Which amount of StemFit should I use in a 12-well plate and which cell density is suitable?
In general the medium volume depends on the area of the culture vessels. Therefore, the volume of StemFit would be 750 µL and a cell density of 5,000 – 10,000 cells/well (Depending on the cell line).
However, the evaportaion is sometimes different between different sizes of plates. If cells grow poorly, we would recommend to increase the volume of media up to 1 ml.
3.: Addition of Rock inhibitor on the passaging day will increase cell viability and cell number.
Can I use StemFit for murine cells?
This is not possible, because murine cells require different types of growth factors compared to ES/iPSCs.
What’s the difference between Basic04 and Basic04 Complete Type(Basic04CT)?
Basic04 does not contain bFGF, therefore bFGF can be added and optimized for a specific purpose. Basic04CT does contain bFGF and can be used for PSC expansion without additional supplement.
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