Schnelle Aufreinigung von high-copy und low-copy Plasmid DNA aus 1-5 mL bzw. 5-10 mL Übernachtkultur von Bakterien.
ermöglichen eine schnelle Aufreinigung von high-copy und low-copy Plasmid DNA aus 1-5 ml bzw. 5-10 ml Übernachtkultur von Bakterien. Die ready-to-use Plasmid DNA liegt nach der Präparation in ausgezeichneter Reinheit in 10 mM Tris Puffer vor und kann direkt in alle gängigen Nachfolgeanwendungen, wie Sequenzierungen, Klonierungen, PCR, Transformationen, Restriktionsanalysen, etc., eingesetzt werden.
| Parameter | High-copy Plasmid | Low-copy Plasmid |
| Max. Probenvolumen | 1-5 ml ÜN-Kultur | 5-10 ml ÜN-Kultur |
| Typische Ausbeute | < 25 µg | < 25 µg |
| Elutionsvolumen | 50 µl | 50 µl |
| Bindekapazität | 40 µg | 40 µg |
| Vektorgröße | < 15 kb | < 15 kb |
| Präparationsdauer | 26 min / 12 preps | 26 min / 12 preps |
| Format | Spin Säule | Spin Säule |
Das Gel zeigt, daß die Ausbeuten mit dem FastGene® Plasmid Mini Kit verglichen mit den Ausbeuten der anderen Kits mindestens gleichwertig ist. Die Präparation mit dem FastGene® Plasmid Mini Kit wurde jedoch nach dem Fast Protokoll (siehe Abschnitt Kurzanleitung) durchgeführt und ist damit deutlich schneller.
Fig. 1: Ergebnis einer Präparation. pBluescript Plasmid DNA wurde aus 1.4 ml E.coli Kultur (DH5α, LB Medium) mit verschiedenen Kits nach Herstellerangaben isoliert. In allen Fällen wurde die DNA in 50 µl Puffer eluiert. Je 2 µl der Eluate wurden auf ein 0,7%iges TAE Agarosegel aufgetragen.
Fig. 2:Typisches Ergebnis einer Sequenzierung von FastGene Plasmid DNA. pBluescript Plasmid DNA wurde mit dem FastGene Plasmid Mini Kit isoliert und 1 µl des Eluates mit dem ABI3100 Sequencer sequenziert. Dye Terminatoren wurde mit dem FastGene Dye Terminator Removal Kit entfernt.
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