Bambanker

Milieu de congélation

Milieu de congélation sans sérum

  • Permet la conservation à long terme des cellules à -80°C ou -196°C
  • Amélioration de la récupération et de la viabilité des cellules après décongélation
  • Milieu de congélation prêt à l’emploi – pas de congélation séquentielle ou programmée requise
  • Ne contient pas de sérum – pas de risque de contamination
  • Utilisable pour toutes les lignées cellulaires connues
  • Longue durée de vie
Prix sur demande


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Numéro de catalogue BB01, BB02, BB03

Détails

Stockage à long terme des cellules

La cryoconservation des cellules de mammifère est très courante en recherche en biologie. La peur de perdre une lignée cellulaire en raison d’une contamination ou d’une défaillance d’un incubateur est souvent la raison pour laquelle l’archivage des cellules est une priorité absolue après la réception ou la création d’une nouvelle lignée cellulaire. Une fois transférées du milieu de croissance au milieu de congélation, les cellules sont généralement congelées à une vitesse contrôlée et stockées dans de la vapeur d’azote liquide ou à -130 ° C dans un congélateur. Bien que la congélation d’une lignée cellulaire soit une procédure courante, des problèmes se posent lorsque des congélateurs appropriés ne sont pas disponibles ou en cas d’introduction d’aléas favorisés par la présence de sérum, de rinçages abusifs ou d’algorithmes de congélation compliqués.

Gagnez du temps tout en sauvant vos cellules

Le milieu de congélation de cellules BambankerTM permet la cryoconservation des cellules à -80 °C (ou dans de l’azote liquide), évitant ainsi le recours à un congélateur très basse température coûteux, et évitant des protocoles de congélation longs et compliqués. Il suffit de (1) récolter les cellules, (2) aspirer le milieu de culture, (3) resuspendre les cellules dans le milieu de congélation BambankerTM (4), transférer dans un tube cryogénique et (5) conserver à -80 °C. Aucune congélation programmée ou séquentielle n’est requise ! BambankerTM est un milieu de cryoconservation sans sérum, prêt à l’emploi, pouvant être conservé au réfrigérateur pendant deux ans. Des flacons pratiques de 20 ml sont disponibles, ce qui rend BambankerTM idéal pour une utilisation par personne dans votre laboratoire. BambankerTM est aujourd’hui le leader du marché au Japon et est cité dans de nombreuses références scientifiques internationales. 

Freezing protocol of Bambanker

Le sérum est source d’aléas dans la conservation à long terme

Les produits BambankerTM sont fabriqués sans sérum. Les milieux de cryoconservation contenant du sérum présentent l’inconvénient de ne pas avoir une composition connue et entrainent des fluctuations sur le taux de récupération des cellules. La reproductibilité des expériences avec des cellules congelées dans un milieu contenant du sérum pourrait être affectée par sa composition (concentration variable de protéines et autres molécules biologiques dans chaque lot de sérum). Utiliser de tels milieux peut donc être à l’origine de problèmes lors de la décongélation des cellules. La composition de BambankerTM étant définie avec précision, vous pouvez donc être sûr que les cellules stockées à des moments différents se comporteront et se rétabliront de la même manière.

Universel – même pour la conservation des cellules souches

Les lignées cellulaires les plus courantes peuvent être préservées avec un grand nombre de cellules intactes après décongélation. Les taux de récupération des cellules même sensibles sont beaucoup plus élevés par rapport aux milieux ordinaires. Par exemple, la banque de cellules JCRB stocke avec beaucoup de succès plus de 1 400 lignées cellulaires différentes avec BambankerTM.

Flexible

Il y a 4 différentes versions de BambankerTM :

1. BambankerTM (Universel)

2. BambankerTM HRM

3. BambankerTM Direct

4. BambankerTM DMSO-Free

Applications

BambankerTM prévient les différenciations non désirées 

No undesired differentiation with Bambanker

Viabilité cellulaire et coloration ALP de cellules souches pluripotentes. Rangée supérieure : un grand nombre de cellules sont détectées deux jours après la décongélation. Les cellules ne montrent aucun changement morphologique après décongélation. Rangée inférieure : BambankerTM ne provoque pas de différenciation cellulaire car toutes les cellules souches congelées produisent encore des taux élevés de phosphatase alcaline, un marqueur pour les cellules souches pluripotentes.

Comparaison de BambankerTM avec un autre milieu de cryoconservation pour la culture de 1400 lignées cellulaires différentes

La banque de cellules JCRB gère environ 1 400 lignées cellulaires différentes. Un faible taux de survie après décongélation de lignées cellulaires congelées (KHYG-1, KAI3, HL60, OVMANA) leur a permis de tester BambankerTM et de le comparer au milieu de cryoconservation utilisé jusqu’à présent pour les quatre lignées cellulaires. Le taux de croissance après décongélation a été comparé pour les cellules stockées avec le milieu de cryoconservation utilisé et BambankerTM.

Toutes les cellules cultivées ont été récoltées en phase de croissance logarithmique. 1 ml de milieu de cryoconservation a été ajouté à environ 1 x 106 cellules dans un cryotube. Les cellules ont été stockées pendant 2 semaines à -80 °C. Les cellules ont été décongelées dans un bain-marie à 37 °C et incubées à 37 °C et 5% de CO2 dans une plaque 96 puits. Chaque jour, le nombre de cellules viables a été déterminé.

Comparison of Bambanker with another cryopreservation medium

Le taux de survie après décongélation des quatre lignées cellulaires (KHYG-1, HL60, KAI3, OVMANA) est très bas avec le produit actuellement disponible dans le commerce et Bambanker ™. Cependant, après décongélation, Bambanker ™ a amélioré la prolifération cellulaire des quatre lignées cellulaires par rapport au produit commercial actuellement utilisé.

→ La banque de cellules JCRB utilise BambankerTM depuis 2014 pour toutes ses lignées cellulaires.

 Télécharger ici AppNote pour plus d’informations

Compatibilité

Cellules congelées avec succès

La banque de cellules JCRB stocke avec succès plus de 1 400 lignées cellulaires différentes avec BambankerTM.

Successfully frozen cell lines with Bambanker

Références

  1. Hatoya, S. et al. Effect of co-culturing with embryonic fibroblasts on IVM, IVF and IVC of canine oocytes. Theriogenology 66, 1083–1090 (2006).
  2. Hikichi, T. et al. Differentiation potential of parthenogenetic embryonic stem cells is improved by nuclear transfer. Stem Cells 25, 46–53 (2007).
  3. Huang, Y. H., Yang, J. C., Wang, C. W. & Lee, S. Y. Dental Stem Cells and Tooth Banking for Regenerative Medicine. J. Exp. Clin. Med. 2, 111–117 (2010).
  4. Lechner, S. M. Interaktionen von Inseminatbestandteilen mit Epithelzellen und Leukozyten im Uterus des Rindes. (2008).
  5. Liu, D. et al. Relation between human decay-accelerating factor (hDAF) expression in pig cells and inhibition of human serum anti-pig cytotoxicity: Value of highly expressed hDAF for xenotransplantation. Xenotransplantation 14, 67–73 (2007).
  6. Mieno, S. et al. Effects of diabetes mellitus on VEGF-induced proliferation response in bone marrow derived endothelial progenitor cells. J. Card. Surg. 25, 618–625 (2010).
  7. Mieno, S. et al. Characteristics and Function of Cryopreserved Bone Marrow-Derived Endothelial Progenitor Cells. Ann. Thorac. Surg. 85, 1361–1366 (2008).
  8. Naito, H. et al. The advantages of three-dimensional culture in a collagen hydrogel for stem cell differentiation. J. Biomed. Mater. Res. – Part A 101, 2838–2845 (2013).
  9. Shimizu, Y. et al. Impaired tax-specific t-cell responses with insufficient control of HTLV-1 in a subgroup of individuals at asymptomatic and smoldering stages. Cancer Sci. 100, 481–489 (2009).
  10. Takata, Y. et al. Generation of iPS Cells Using a BacMam Multigene Expression System. Cell Struct. Funct. 36, 209–222 (2011).
  11. Tamai, Y. et al. Potential contribution of a novel Tax epitope-specific CD4+ T cells to graft-versus-Tax effect in adult T cell leukemia patients after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. J. Immunol. 190, 4382–92 (2013).
  12. Zaidi, S. K. et al. Runx2 deficiency and defective subnuclear targeting bypass senescence to promote immortalization and tumorigenic potential. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 104, 19861–19866 (2007).

Documents

Manuel

Manuel_BB01

Application Note

Comparing BambankerTM with another cryopreservation medium for the cultivation of 1,400 different cell lines

MSDS

Bambanker_MSDS

Protocole

Bambanker_Protocole

Flyer

Bambanker_Fyler

3 avis pour Bambanker

  1. Dr Sandra Hoffmann, Institut für Humangenetik, Universität Heidelberg

    Mit der Verwendung des Bambaker Einfriermediums konnten wir den prozentualen Anteil überlebender iPS-Zellen nach dem Auftauen wesentlich erhöhen. Wir sind mit diesem Produkt überaus zufrieden und verwenden es mittlerweile für alle Stammzellkulturen.

    Translation by Nippon Genetics:

    By using the Bambaker freezing medium, we were able to increase significantly the percentage of surviving iPS cells after thawing. We are very satisfied with this product and now we use it for all our stem cell cultures.

  2. Dr. Maria Wiese, University Medical Center Göttingen (UMG)

    Since many years we are working with primary cell cultures derived from high-grade brain tumors which are highly susceptible to environmental changes and differing culture conditions. Thus, freezing and thawing is a challenging process for these cells. According to our experiences, we could not avoid to lose 30% to 40% of living cells after each freezing/thawing cycle. In addition, the cells need a recovery time of at least five days after freezing in our previous freezing medium, obtained from other manufacturers. We’ve recently tested the Bambanker medium with striking results: recovery times of only two days of 80% of living and “healthy” cells. We observed this improvement of recovery time and proportion of living cells with all four cell lines, that we’ve tested so far. We are very satisfied with Bambanker and will continue to use it.

    Translated by Nippon Genetics:

    Wir arbeiten seit vielen Jahren mit primären Zellkulturen, die aus weitfortgeschrittenen Gehirntumoren gewonnen werden. Diese Zellen reagieren sehr empfindlich auf Umweltveränderungen und sich ändernde Kulturbedingungen. Das Einfrieren und Auftauen wird damit zu einem schwierigen Prozess für diese Zellen. Unseren Erfahrungen nach können wir einen Verlust von 30 % bis 40 % der lebenden Zellen nach jedem Einfrieren/Auftauen Zyklus nicht vermeiden. Zusätzlich benötigen die Zellen nach dem Einfrieren in unserem vorherigen Medium eines anderen Herstellers eine Erholzeit von mindestens fünf Tagen. Kürzlich haben wir das Bambanker Medium mit faszinierenden Resultaten getestet: Erholzeiten von nur zwei Tagen von 80 % der lebenden und “gesunden” Zellen. Wir konnten diese Verbesserung der Erholzeit und die Proportion von lebenden Zellen bei allen vier Zelllinien, die wir bisher getestet haben, beobachten. Wir sind sehr zufrieden mit Bambanker und werden es weiterhin benutzen.

  3. Dr. Arihiro Ohara of National Institute of Biomedical Laboratories JCRB cell bank

    “JCRB cell bank has carried out cell bank business for 30 years and we currently store 1400 types of cell lines. In 2013, we offered about 4,300 ampules for a fee to domestic and foreign researchers. Due to the high number and the wide variety of cell lines, we had some problems.
    Thus some users complained that their cell lines of dying after thawing, resulting in unsuccessful cultivation. Especially four types of cell lines were a problem which had to be urgently improved. Therefore, we compared Bambanker™ with our currently used commercial preservation medium in a cryopreservation test. The cell lines, which were stored with Bambanker™, showed much higher cell proliferation than cells, which were stored with our currently used commercially available product. Surprisingly, with Bambanker™ we got for all four cell lines very reproducible results.
    In addition, Bambanker has no differences between the lots since it does not contain serum. We are very grateful for that because it strongly simplifies the delivery procedure overseas. In the future, we will completely change to Bambanker™ in order to improve the survival rate and growth of our cells. We are thankful for resolving that long-standing problem and recommend Bambanker™ to all domestic researchers and foreign cell banks.
    This data will be also described at our JCRB website. In the near future we plan to test Bambanker™ for human tissue-derived and human iPS cell lines.”

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