Midori Green Advance

Numéro de catalogue: MG04

1 ml MIDORIGreen Advance coloration ADN/ARN in gel ou post staining

 

Avantages: 

  • Coloration in-gel de l’ADN/ARN
  • Non toxique, non carcinogène
  • Alternative sûre au bromure d’éthidium 
  • Haute fluorescence
  • Optimal pour la lumière UV

MIDORIGreen Advance

MIDORIGreen  Advance est une alternative sûre à la coloration traditionnelle au bromure d’éthidium. Il s’agit d’un colorant non cancérigène qui permet de détecter les ADNdb, les ADNsb et les ARN dans des gels d’agarose avec une très grande sensibilité. MIDORIGreen Advance peut être utilisé avec une lumière UV ou avec notre technologie innovante à LED bleu/vert.

 

La deuxième génération de la coloration in-gel 

MIDORIGreen Advance est un colorant non cancérigène de deuxième génération. Optimisé pour un signal plus lumineux lorsqu’il est excité par une lumière UV ou une lumière bleue/verte. Il garde les avantages d’être non cancérigène et d’avoir un excellent rapport bruit/signal. Comme le montre la Fig. 1, MIDORIGreen Advance est meilleur que le bromure d’éthidium avec la technologie à LED bleu/vert.

 

Fig. 1 : Comparaison de la sensibilité entre MIDORIGreen Advance (vert à gauche) et le bromure d’éthidium (rouge à droite) en utilisant un transilluminteur à LED bleu/vert.

 

MIDORIGreen Advance montre une très grande sensibilité même pour des petits fragments d’ADN. Le facteur de dilution peut atteindre 1:25000 donc 4 à 6 μl sont suffisant pour colorer 100 ml de gel d’agarose. Cela donne une possibilité de colorer entre 17 à 25 litres de gel d’agarose.

 

Sécurité prouvée 

MIDORIGreen Advance fournit des signaux avec une intensité comparable au bromure d’éthidium. Néanmoins, la sécurité de l’utilisateur ne doit pas être compromise. Par conséquent, plusieurs tests ont été effectués avec MIDORIGreen Advance et, conformément à ces tests, MIDORIGreen Advance est sûr.

 

 Télécharger ici le rapport de sûreté de MIDORIGreen.

Retour client

Plus de 500 citations dans les journaux scientifiques !

MIDORIGreen Advance a été utilisé avec succès dans de nombreux laboratoires. Le retour d’experience a été très positif. Vous trouverez ci-dessous quelques résultats provenant de scientifiques indépendants :

 

Client #1

« …we have tested Midori Green Advance and we are very excited about it. Please find attached to this email a typical picture…. »

 

Dr. Olaf Voolstra,
Biosensor Research Group, Hohenheim University Stuttgart, Germany

 

Client #2

Bromure d’éthidium (gauche) en comparaison avec le MIDORIGreen Advance (droite) sur une table UV

 

Data kindly provided by

Mr. Schuster,

Friedrich-Alexander-University Erlangen-Nürnberg, Germany

 

Client #3

Comparaison du bromure d’éthidium avec MIDORIGreen Advance sur une table UV

 

Data kindly provided by

Ms. Abel,

Heinrich-Heine-University Düsseldorf, Germany

 

Coloration in-gel

  1. Préparer 100 ml de gel d’agarose (concentration comprise entre 0,8% et 3,0%) et chauffer jusqu’à ce que la solution soit complètement claire sans particule résiduelle visible.
  2. Ajouter 4-6 µl de colorant ADN MIDORIGreen Advanced à la solution et mélanger doucement. Laisser refroidir le gel à 50-60°C et le faire couler sur le plateau pour gel. Quand le gel est solidifié, disposer les échantillons et procéder à l’électrophorèse.
  3. Détecter les bandes en utilisant un illuminateur UV ou LED. Des filtres de gélatine jaune ou verte- ou du cellophane devront être utilisés pour la photographie.

 

Poststaining

  1. La solution de poststaining avec le colorant ADN MIDORIGreen Advanced peut être utilisée 2 ou 3 fois.
  2. Si la solution de coloration a pour but d’être réutilisée elle doit donc être préférentiellement stockée à température ambiante et dans le noir. 
  3. Pour des gels d’agarose ayant une épaisseur <0,5 cm, 10-25 µl du colorant doit être utilisé pour 100 ml de tampon.
  4. Le temps de coloration optimal (5 – 60 minutes) et la quantité de colorant dépendent de l’épaisseur du gel.

REMARQUE : il n’est pas recommandé d’utiliser la solution pour poststaining avec des tampons contenant du SDS à cause de l’interaction entre ces deux produits créant des signaux parasites !

Compatibilité

MIDORIGreen Advance est compatible avec les sources de lumières communément utilisées : lumière UV, LED bleue, LED bleu/vert. Comme le bromure d’éthidium, MIDORIGreen Advance peut être utilisé pour la coloration In-gel ou poststaining.

 

Colorant ADN MIDORI GreenLED bleu/vertLED bleueLumière UVIn-GelPoststainingDirecte
Advance
(MG04)
KompatibelKompatibelKompatibelKompatibelKompatibelNicht Kompatibel
Direct
(MG06)
KompatibelKompatibel Nicht KompatibelNicht KompatibelKompatibel
Xtra
(MG10)
KompatibelKompatibelKompatibel aber nicht empfohlenKompatibelKompatibelNicht Kompatibel

 

Kompatibel Compatible

Kompatibel aber nicht empfohlen Compatible, mais non recommandé

Nicht Kompatibel Non recommandé

Puis-je utiliser Midori Green Advance (MGA)pour une électrophorèse en champ pulsé (PFGE) ? Normallement je fais du poststaining avec le bromure d’éthidium

Un protocol de poststaining avec MGA est disponible dans la section protocol.

 


 

Pouvez-vous me donner des détails sur la marche à suivre après utilisation du MGA ? La molécule étant sensible à la lumière je me demandais si le gel contenant du MGA pouvait être jeté après avoir été exposé à la lumière ?

MGA est non toxique, vous pouvez le jeter dans les déchets chimiques de laboratoire. L’émissivité du MGA sera détruite par la lumière, mais cela ne signifie pas que la structure chimique sera modifiée. Il n’est pas nécessaire de détruire la molécule car elle n’est en aucun cas nocive. C’est le gros avantage par rapport au bromure d’éthidium: aucune élimination spéciale n’est nécessaire.


 

Pourquoi MGA et MGD ne peuvent-ils pas être utilisés de la même manière ?

Les structures chimiques sont complètement différentes. Nous avons testé l’utilisation du MGD en tant que MGA et inversement et nous ne pouvons pas recommander de les utiliser de la même manière. Lorsque vous essayez d’utiliser le MGD en tant que MGA, vous avez besoin de beaucoup de MGD et d’échelles pour obtenir des bandes visibles. Les échantillons de faible concentration pourraient donc être non détectés. Le MGD a été conçu pour être ajouté à l’échantillon et est beaucoup moins concentré que le MGA. Il n’est donc pas rentable d’utiliser le MGD à la place du MGA car vous aurez besoin d’une quantité 10 fois supérieure dans le gel pour pouvoir observer des bandes. Lorsque vous essayez d’utiliser le MGA en tant que MGD, cela pose également problème, car la concentration de MGA est trop élevée et migre dans la direction opposée. J’ai essayé de réduire la concentration de MGA mais dans ce cas vous ne voyez que quelques bandes qui sont très faibles, et ceci quelle que soit la dilution utilisée. En résumé, les deux colorants sont conçus (avec une formule structurelle différente) et optimisés pour différentes applications (in gel et dans l’échantillon) et il n’est pas recommandé d’essayer de les utiliser autrement.


 

Quelle est la différence entre le MGA et le MGD et quelle est la stabilité de ces colorants ?

La principale différence est que Midori Green Advance (MGA) est destiné aux applications in gel et au poststaining (cela signifie qu’il est utilisé comme le bromure d’éthidium) alors que Midori Green Direct (MGD) est ajouté directement à l’échantillon. En fonction du système de documentation, nous vous recommandons d’utiliser l’un ou l’autre, mais vous pouvez utiliser les deux pour chaque type d’illuminateur (UV 302, 365 nm, illuminateur à LED bleue et transilluminateur à LED bleu/vert). Par exemple, nous recommandons d’utiliser le MGA si l’utilisateur dispose d’un transilluminateur UV, car les résultats obtenus sont fantastiques avec ce colorant. Vous obtenez également une performance vraiment exceptionnelle avec nos instruments à LED bleu/vert et le MGD : pas de bruit de fond et un signal intense. Les deux colorants étant stables à température ambiante, leur expédition à température ambiante ne pose pas de problème, mais nous vous recommandons de les stocker à 4 °C.


 

Est-ce que le MGA et le MGD fonctionnent avec les gels d’agarose et d’acrylamide ?

Nos clients nous ont fait des retours sur le le fait que le MGD et MGA (post staining) fonctionnent avec des gels d’acrylamide mais ils ont initialement été conçus pour les gels d’agarose.


 

J’ai stocké le MGA à -20°C pendant 6 jours ? Puis-je encore l’utiliser ?

La congélation détruit la fonctionnalité du MGA. Vous pouvez toujours essayer mais vous risquez fortement de ne rien voir.


 

J’utilise MGA dans les gels d’agarose, pourquoi les petites bandes sont invisibles quand je fais migrer pendant 35 minutes et que recommandez-vous ?

Midori Green Advance est chargé positivement et migre dans la direction opposée de l’ADN, donc le gel se décolore par le bas. Pour voir des petites bandes vous pouvez réduire le temps de migration à 25 minutes. Si vous voulez un temps de migration plus long, vous pouvez à ce moment là faire du poststaining. Vous pouvez aussi utiliser la coloration in gel et ensuite faire un peu de poststaining. Dans tous les cas, le gel sera coloré et vous pourrez observer les bandes de bas poids moléculaire. Vous pouvez également utiliser Midori Green Direct au lieu de Midori Green Advance. Ce colorant est ajouté à l’ADN donc toutes les bandes seront colorées peu importe le temps de migration. Un autre avantage est l’absence de bruit de fond. Si vous utiliser une lumière LED bleue ou notre technologie à LED bleu/vert à la place des UV, vous aurez des résultats incroyables.


 

Sur le fiche de données du Midori Green Advance il est écrit que la solution de poststaining peut être utilisée 2 à 3 fois. Pendant combien de temps peut-on utiliser la solution de poststaining tout en ne perdant pas trop de sensibilité ?

En fait, nous avons des clients qui l’utilisent plus que 2-3 fois. Si le bain de coloration est à l’abri de la lumière tout le temps, vous pouvez l’utiliser 2-3 fois sans réduction de l’intensité du signal. Il est également possible de l’utiliser 5-8 fois sans perte de signal mais cela dépend de la taille du gel et de la quantité des échantillons. Si vous détectez une perte d’intensité, vous pouvez simplement ajouter un petit peu de MGA et donc retrouver un signal aussi bon qu’avant.


 

Puis-je utiliser le MGA une fois la date d’expiration passée ?

Oui vous pouvez. La date d’expiration est juste la date limite où nous vous garantissons le produit, mais en général il dur beaucoup plus longtemps.


 

J’obtiens des bandes additionnelles après l’utilisation du MGA est-ce normal ?

C’est possible si vous utilisez du SDS dans le tampon de charge.


 

Est-il possible d’utiliser Midori Green dans un gel de Polyacrylamid/Urée ?

Cela fonctionne très bien.


 

Est-ce que le Midori fonctionne avec les gels Urée/Formamide ?

Malheureusement cela ne marche pas à cause du Formamide. Les gels urée fonctionnent.


 

Est-ce que le Midori Green contient du DMSO ?

Midori Green ne contient pas de DMSO.


Puis-je utiliser des échelles contenant de l’orange G, du bleu de bromophénol ou du xylène cyanol FF avec MGA ?

Oui vous pouvez. Ils ne causent pas de problème à part le bleu de bromophénol qui peut réduire l’intensité du signal ou entrainer la formation de nuages dans le gel.


Puis-je ajouter MGA au tampon de migration pour réduire la décoloration du gel ? Si oui quelle est la quantité que je devrais ajouter ?

Oui vous pouvez ajouter MGA au tampon de migration, de l’ordre de 8 µL pour 100 ml de tampon.

on 11/29/2019

Great signal for DNA, but rather weak for RNA (using formaldehyde-containing loading buffer), still not as good as EtBr.

Comment from Nippon Genetics:

Dear Mr Arroyo,

Many thanks for your feedback. I am glad to see that you were able to obtain very good results in staining DNA with MIDORI Green Advance. Regarding the results with RNA, I would like to suggest to you a publication from the year 2014:

Influence of trypsinization and alternative procedures for cell preparation before RNA extraction on RNA integrity.

The paper describes the use of MIDORI Green Advance for the staining of RNA separated using bleach RNA gels. Fig. 1-7 show agarose gels that were stained with MIDORI Green Advance.

An explanation for the difference that you experienced when comparing the signal of EtBr to MIDORI Green Advance could be due to the transilluminator used. We would like to invite you to see the signal of a gel you have prepared using our Blue/Green LED transilluminator or our FastGene UV-light table.

Best regards
Dr. Marcelo Lanz
Head of Product Management

on 10/15/2018

Wir sind sehr zufrieden mit Midori Green Advance, perfekte alternative zur EtBr.

Translation by Nippon Genetics:

We are very happy with Midori Green Advance, which is a perfect alternative to EtBr.

on 07/23/2018

Midori Green Advance liefert sehr robuste Ergebnisse, welche absolut mit EtBr vergleichbar sind. Wir haben EtBr aus unseren Laboren mittlerweile vollständig durch Midori Green Advance, sowie Midori Green Direct ersetzt.

Translation by Nippon Genetics:

Midori Green Advance delivers very good results that are absolutely comparable to EtBr. We replace completely EtBr from our laboratories with Midori Green Advance and Midori Green Direct.

on 06/11/2018

Absolutely the best alternative to EtBr. We changed many years ago from EtBr to Midori and since then, we never had any issues. Signals are as good as before and low toxicity works well with student environment.

on 11/23/2017

Wir verwenden Midori Green Advance seit 2014 in unserer Abteilung und sind sehr zufrieden damit. Sowohl im täglichen Laboralltag als auch in Studentenpraktika liefert der Farbstoff sehr gute Ergebnisse.

Translated by Nippon Genetics:

We use Midori Green Advance in our department since 2014 and are very satisfied with it. In everyday laboratory practice as well as in practical course for students the stain delivers very good results.

on 10/24/2017

„…haben wir das Midori Green Advance getestet und sind begeistert!... "

Translated by Nippon Genetics:

“…we have tested Midori Green Advance and we are very excited about it….”
Évaluations des clients

(4.5)

Merci beaucoup pour votre évaluation.
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