Kit ARN FastGene Basic

Détails

Nouveau niveau de pureté d’ARN

Les kits ARN FastGene^® ont été développés pour la purification rapide, efficace et propre de l’ARN des tissus et des cellules. La technologie à base de silice n’utilise pas de phénols. Les kits ARN FastGene^® sont disponibles en deux versions différentes. Le kit ARN FastGene^® Basic est idéal pour la purification de l’ARN où de petites quantités d’ADN copurifiées ne posent pas de problème. Le kit ARN FastGene^® Premium assure l’élimination complète de l’ADN génomique.

ARN de la plus grande qualité

Les kits ARN FastGene^® fournissent des ARN de la plus grande qualité. La qualité de l’ARN est mesurée en déterminant un RIN (RNA integrity number). Un ARN de grande qualité donnera un RIN supérieur à 8, 10 étant la valeur maximale. Les kits ARN FastGene^® Basic et Premium purifient l’ARN à un niveau comparable aux leaders du marché (voir Fig. 1). L’ARN est donc dans un état idéal pour les applications en aval, telle que la transcription inverse.

Fig. 1 : Détermination de la qualité de l’ARN à l’aide d’un bioanalyseur Agilent. Les kits ARN FastGene^® fournissent des ARN de grande qualité à plusieurs reprises.

Grands rendements

Obtenir un bon rendement lors de la purification de l’ARN est essentiel. Les kits ARN FastGene^® Basic et Premium offrent un rendement très élevé, permettant ainsi plusieurs analyses à partir d’une seule purification d’ARN. Comparé aux leaders du marché, le kit ARN FastGene^®  Basic fournit un rendement plus élevé avec une procédure de purification optimisée.

Fig. 2 : Rendement total d’acide nucléique en µg. Les kits ARN FastGene^® offrent un rendement très élevé.

Procédure très rapide

Les kits ARN FastGene^® Basic ont une procédure très simple et rapide, optimale pour un grand nombre d’échantillons. De plus, un protocole spécial pour les grandes quantités a été créé. Le tampon nécessaire pour ces grandes quantités peut être acheté séparément sans qu’il soit nécessaire d’acheter un kit complet.

Le danger de l’ADN génomique

La purification de l’ARN s’accompagnera toujours de la possibilité d’une contamination par de l’ADN génomique. De nombreuses solutions ont été développées pour résoudre ce problème : concevoir des amorces pour les limites exon-exon, qui ne conduiraient pas à une amplification de l’ADN génomique contenant un intron ; et / ou procéder au traitement de l’ARN purifié avec une DNase, une enzyme dégradant spécifiquement l’ADN. Il est important que cette étape soit bien optimisée car le traitement par DNase pourrait également conduire à une dégradation de l’ARN.

Fig. 3 : Détection de la contamination de l’ADN génomique par qPCR. L’ARN isolé avec le kit du concurrent Q présente des valeurs de Cq nettement plus basses qu’avec le kit ARN FastGene® Premium.

Dégradation optimale de l’ADN pour un ARN très pur

De nombreux kits de purification d’ARN effectuent l’étape de dégradation de l’ADN sur une membrane de silice. Néanmoins, cette étape est beaucoup plus efficace lorsqu’elle est effectuée en solution. Le kit ARN FastGene^® Premium comporte justement une étape de dégradation de l’ADN après élution des acides nucléiques. La contamination de l’ADN génomique a été analysée via qPCR en utilisant des amorces spécifiques d’ADN génomique. La purification de l’ARN avec le kit du concurrent Q comportant un traitement par DNase a montré une variabilité de la contamination par l’ADN (voir Fig. 4) lorsque différentes purifications ont été analysées. De plus, les valeurs Cq obtenues après qPCR sont plus basses avec le kit du concurrent Q qu’avec le kit ARN FastGene^® Premium. Les analyses montrent que suite au traitement ultérieur à la DNase, la contamination par l’ADN de l’ARN purifié à l’aide du kit ARN FastGene^® Premium est bien inférieure à celle du leader du marché.

Fig. 4 : Les purifications du concurrent Q montrent une grande variabilité entre les essais 1 et 2, probablement en raison de la plus faible efficacité enzymatique. Le kit ARN FastGene^® Premium fournit un ARN très pur de manière consistante en raison de l’action de la DNase en solution plutôt que sur membrane.

Mini colonne d’élution FastGene^® pour une concentration maximale et une récupération parfaite

Le kit ARN FastGene^® Premium est livré avec une mini colonne d’élution FastGene^® au design unique permettant un volume d’élution de seulement 10 µl et créant ainsi des stocks d’ARN très concentrés, essentiels pour une faible quantité de tissu ou de matériel cellulaire. Le taux de récupération est très élevé (> 95%) même à des volumes d’élution très faibles. Le leader du marché ne peut atteindre nos taux de rendement et de récupération. Regardez par vous-même les résultats ci-dessous :

Documents

FAQ

Quelle est la capacité de la colonne pour la liaison de l’ARN ?

La capacité de la colonne pour la liaison de l’ARN est de 500 µg.

Puis-je utiliser le kit pour l’extraction d’ARN provenant d’échantillons de sang ?

Ce kit n’est développé que pour les tissus d’animaux, il n’est donc pas compatible avec la purification d’ARN à partir d’échantillons de sang.

Je souhaite réduire le volume d’élution dans le kit ARN basic au-dessous de la quantité standard de 50 µL pour enrichir l’ARN. Est-ce possible ?

Diminuer le volume d’élution diminue le taux de récupération, mais l’enrichissement en ARN est possible. Les données internes montrent que le taux de récupération pour 30 µL est d’environ 86% (la concentration est environ 1,49 fois plus élevée que 50 µL), contre environ 96% pour un volume d’élution de 50 µL.

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