FastGene Scriptase II cDNA 5x ReadyMix OdT

ReadyMix inkl. Random Hexamers und Oligo-dTs

  • Enthält alle notwendigen Komponenten zur Durchführung einer reversen Transkription.
  • FastGene® Scriptase II cDNA 5x ReadyMix OdT enthält u.a. Oligo dTs. Für den FastGene® Scriptase II cDNA 5x ReadyMix ohne Oligo dTs klicken Sie hier.
Applikationen
  • Quantifizierung der Genexpression
  • RT-qPCR
  • Next Generation Sequencing
  • Niedrige RNA Konzentrationen
  • Schwierige Template
Preis auf Anfrage


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Art. Nr. LS65 100 Reaktionen
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Details

Ready Mix

Die FastGene® Scriptase II ist eine optimierte reverse Transkriptase mit einer reduzierten RNase H-Aktivität. Der 5x Ready Mix enthält alle notwendigen Komponenten zur Durchführung einer reversen Transkription in nur einem Reaktionsgefäß.

Optimiertes Enzym

Die modifizierte reverse Transkriptase ermöglicht die cDNA Synthese auch bei einer sehr geringen RNA Konzentration. Mutationen wurden in die RNase H Domäne der MuLV reversen Transkriptase eingebaut. Die RNA wird während der Erststrang-cDNA-Synthese nicht degradiert, so dass eine höhere Ausbeute an cDNA in der vollen Länge gewonnen wird. Zusätzlich führt die höhere thermische Stabilität der FastGene® Scriptase II zu einer gesteigerten Robustheit des Enzyms. Die FastGene® Scriptase II ist mit ihrer RNase H Domänmutation und ihrer höheren thermalen Stabilität die optimale Wahl für komplexe Anwendungsgebiete, wie RT-qPCR and NGS.

Niedrigere RNase H Aktivität für längere cDNA

Die FastGene® Scriptase II hat eine modifizierte RNase H Domäne. Aufgrund dieser wird die RNA nicht degradiert und dient als Templat für längere cDNAs – mit dem Ergebnis von Fragmentgrößen bis zu 12 kBp.

Optimierte Enzyme für die qPCR

Die FastGene® Scriptase II liefert ausgezeichnete cDNA Template für Nachfolgeapplikationen, wie z.B. qPCR und NGS. Die in voller Länge vorhandene, resultierende cDNA spiegelt ein kompletes Bild des zugrundeliegenden Gens wieder und ist in der Lage Modifikationen, wie z.B. Splicing Varianten, zu zeigen.

Zusammensetzung

Ready-to-use

Der FastGene® Scriptase II 5x ReadyMix enthält alle notwendigen Komponenten für eine reverse Transkription:

  • FastGene® Scriptase II
  • 5x FastGene® Scriptase II Puffer
  • dNTPs
  • RNase Inhibitor
  • Random Hexamer
  • Oligo dTs
  • Helferprotein

Protokoll

1. Vermischen Sie den ReadyMix mit dem RNA-Template unter Verwendung des folgenden Pipettierschemas:
5x FastGene® Scriptase II ReadyMix (LS65) 4 µL
RNA-Templat (die Konzentration der Template-RNA kann bis zu 2,5 μg betragen) x µL
Steriles Wasser auf 20 µL auffüllen
2. Inkubation für 10 Minuten bei 25 °C.
3. Inkubation für 60 Minuten bei 42 °C.
  • Hinweis: Die empfohlene Inkubationszeit kann je nach Konzentration auf 5 Minuten reduziert werden. Schauen Sie sich hierzu unsere „Technical Note“ an.
 4. Inaktivierung der FastGene® Scriptase II durch Inkubation bei 85°C für 5 Minuten.
5. Lagerung der cDNA bei -20 °C oder direkte Verwendung für nachfolgende Anwendungen.

Dokumente

Manual

LS65_Scriptase II – Ready Mix_Manual

Technical Note

Very fast reverse transcription reactions (5min)

Application Notes

Cloning of isoflavone biosynthesis related enzyme using RNA extracted from soybene

Comparative study of reverse transcriptase reaction using RNA extracted from zebrafish fertilized eggs

Reverse transcriptase reaction for quantitative expression analysis using RNA extracted from mesenteric adipose rat tissue

Comparative study of RT-reaction by using RNA extracted from mouse lymph node

Comparative study of reverse transcriptase reaction using RNA extracted from peritoneal cells of sterile peritonitis model mouse

Oligo dT verification of FastGene® ScriptaseⅡ cDNA 5x ReadyMix OdT

MSDS

LS65_FG Scriptase II cDNA 5x Ready Mix OdT_MSDS

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