FastGene Scriptase Basic

Details

Optimiert für eine höhere Leistung

Die FastGene^® Scriptase Basic ist eine verbesserte Version der reversen Transkriptase des Murine Leukemia Virus. Wie die Wildtyp MuLV kann sie einen cDNA Strang synthetisieren, besitzt sie eine reduzierte RNase H Aktivität und Prozessivität. Ihre Robustheit wurde jedoch immens erhöht. Damit verkörpert die FastGene^® Scriptase Basic das perfekte Enzym für hohe RNA Mengen und leichte Template.

Applikationen

• Quantifizierungen von Genexpressionen
• Endpunkt RT-PCR
• Hohe RNA Konzentrationen

Keine Inhibition – auch bei großen Konzentrationen

Die besondere Pufferrezeptur ermöglicht die Verwendung sehr hoher RNA Konzentrationen. Andere reverse Transkriptasen sind nicht in der Lage dazu solch hohe RNA Mengen zu bewältigen.

Konzipiert für die Endpunkt RT-PCR

Die FastGene^® Scriptase Basic wurde für hohe RNA Konzentrationen bei der Endpunkt RT-PCR konzipiert. Sie ist jedoch genauso gut in der Lage niedrigere RNA Mengen zu prozessieren.

Vergleich der FastGene^® Scriptase Basic und einer herkömmlichen MuLV

(A) Competitor N                                                                                              (B) FastGene^® Scriptase Basic

RNA (ng) 2       1        0.5     0.1    0.01                                                                          2        1       0.5     0.1    0.01

Bild 1: Höhere Sensitivität der FastGene^® Scriptase Basic.
Verglichen mit dem Wildtyp MuLV (A) ist die FastGene^® Scriptase Basic (B) eine optimierte MuLV reverse Transkriptase mit einer höheren Sensitivität, die auch noch bei einer RNa Konzentration von 0.1 ng dazu in der Lage ist, ein Template zu erzeugen.

Als separates Enzym oder cDNA Synthese Kit erhältlich

Die FastGene^® Scriptase Basic ist als separates Enzym inklusive Enzympuffer und dNTPs erhältlich oder in einem cDNA Synthese Kit (FastGene Scriptase Basic cDNA Kit), das darüber hinaus noch folgende Komponenten enthält:

• Oligo dTs
• Random Hexamere
• RNase Inhibitor.

Die Packungsgröße mit 100 Reaktionen wurde bewusst so gewählt, dass ausreichend Material für eine 96-well Platte vorhanden ist.

Dateien

FAQ

Ich verwende Ihre Scriptase Basic (LS52) und möchte wissen, ob ich dieses Enzym in Kombination mit einem DNA Removal Kit verwenden kann, das einen DNase Stop-Puffer mit 20 mM EGTA enthält?

Alle DNA/RNA arbeitenden Enzyme benötigen Metallionen wie z.B. Mg²⁺, Ca²⁺ oder Mn²⁺. DNase I benötigt ebenfalls Mg²⁺ oder Ca²⁺. Aus diesem Grund muss DNase I Stop-Puffer 20 mM von EGTA oder EDTA (als Metall-Chelatbilder) enthalten, um die Metallionen einzufangen. Für die meisten Enzyme liegen die Arbeitsbedingungen bei etwa 1-10 mM. 20 mM EGTA  reichen also aus, um beide Reaktionen, DNase-Behandlung und die reverse Transktiption zu stoppen.

Damit die Scriptase Basic (LS52) weiter arbeitet, muss die Mg²⁺-Konzentration weiter erhöht werden. In diesem Fall bedeutet es aber, dass die DNAse I erneut beginnt und DNA/cDNA abgebaut wird. Dies ist ein bekanntes Problem der reversen Transkriptase.

Was ist der optimale Temperaturbereich der Scriptase Basic und Scriptase II?

Der optimale Temperaturbereich für die Scriptasen beträgt 42°C bis 50°C. Eine Temperatur über 50°C wird nicht empfohlen.

Können Scriptase Basic und Scriptase II für NGS-Anwendungen verwendet werden?

Da Scriptase Basic und Scriptase II nur ssDNA generieren, sind sie nicht für NGS-Anwendungen geeignet.

Produktanfrage

Haben Sie Fragen zum Produkt? Kontaktieren Sie uns!