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FastGene® Western ECL Kit – Chemilumineszierende Western Blot Detektion
Das FastGene® Western ECL Kit ist ein auf Luminol basierendes chemilumineszierendes Substrat.
Es wird eingesetzte für die Erkennung mit Meerrettichperoxidase (HRP) markierten sekundären Antikörpern.
Die Erkennung von Antigenen im hohen Femmtogramm- oder geringen Picogramm-Bereich wird durch die hervorrangende Empfindlichkeit sowie die langanhaltende Signaldauer ermöglicht.
Die lange Signaldauer ist darüber hinaus dafür verantwortlich, dass sowohl digitale als auch Film-basierte Aufnahmen ohne Verlust der Signalintensität detektiert werden können.
Um eine optimale Signalempfindlichkeit und Signaldauer zu erreichen, wird der Einsatz von geeigneten Verdünnungen der Primär- und Sekundär-Antikörper empfohlen.
Arbeitsablauf bei Verwendung des FastGene® Western ECL Kits
Die Luminol-Lösung und die Peroxid-Lösung werden in einem Verhältnis von 1:1 zusammengegeben und gut durchmischt.
Pro cm2 wird 0.1 mL der Lösung auf die Membran gegeben.
Die Membran wird mit der Protein enthaltenden Seite nach oben auf eine saubere und gerade Oberfläche platziert.
Nach Entfernen der Membran von der chemilumineszierenden Substratlösung wird die Membran mit einem digitalen Aufnahmegerät aufgenommen.
Katharina Gryksa-Zotz Lehrstuhl für Neurobiologie und Tierphysiologie Universität Regensburg –
Wir sehen nach 30sec Inkubation bessere Protein Banden als nach 5min Inkubation mit einem vergleichbaren Kit eines anderen Herstellers.
Translated by NIPPON Genetics EUROPE:
We see better protein bands after 30 seconds of incubation than after 5 minutes of incubation with a comparable kit from another manufacturer.
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